tests de diagnostic

Intravenous immunoglobulin (IVIG) therapy is a commonly used treatment for various autoimmune and inflammatory diseases. IVIG is a preparation of pooled human immunoglobulin G (IgG) derived from thousands of blood donors. Natural antibodies and natural autoantibodies are prominent in these preparations. While IVIG therapy has shown significant benefits in managing some autoimmune/autoinflammatory conditions, it is important to consider its potential effects on autoantibody and inflammatory disease lab tests.
Autoantibody testing plays a crucial role in diagnosing and monitoring autoimmune diseases such as systemic lupus erythematosus (SLE), rheumatoid arthritis, autoimmune neurological diseases, and many others. IVIG therapy can affect results in several ways:

• IVIG contains a wide range of antibodies that can compete with patient-derived autoantibodies during testing. This competition may lead to lower detectable levels of autoantibodies, potentially resulting in false negative results.
• IVIG preparations can also contain certain autoantibodies. This may lead to detectable levels of autoantibodies, potentially resulting in false positive results.
• Temporary suppression of autoantibody production: IVIG therapy can transiently suppress the production of autoantibodies, particularly in patients with active autoimmune diseases.
• This effect may lead to a decrease in autoantibody levels. If autoantibody levels(titers) are being used to follow-the disease course (remission or flares) this can be helpful feature to gauge effective response of IVIG.
• Interference with Specific Autoantibody Assays: Some autoantibody assays utilize techniques that may be affected by the presence of IVIG. For example, enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) may exhibit non-specific binding or interference due to the high IgG concentration in IVIG preparations. Laboratories should be advised if a patient has received IVIG treatment so that methods can be used to minimize false positive or false negative results.
• Transient impact on Other  Inflammatory Markers: IVIG therapy can transiently affect various inflammatory markers, including acute phase reactants (i.e., CRP, ESR), cytokines, chemokines, and adhesion molecules. These changes may be related to the immunomodulatory effects of IVIG and can result in factitious fluctuations of the laboratory test results. It is important to consider the timing of patient sampling when interpreting these markers.
• Interference with Immunological Assays: IVIG contains a variety of immunoglobulins, which may interfere with specific immunological assays used to measure cytokines, chemokines, or other inflammatory markers.

SUMMARY: IVIG has a complex effect on autoantibody and related serological biomarker lab test results. Healthcare professionals should be aware of these effects to interpret test results accurately and make informed clinical decisions. Close collaboration between clinicians and laboratory specialists is essential to navigate the challenges posed by IVIG therapy and ensure optimal patient care in the context of autoimmune and inflammatory diseases.

RECOMMENDATION: If the patient is already receiving IVIG and there is a need to do autoantibody or related biomarker testing, it is best to draw the serum or plasma sample 1-2 days PRIOR to the next IVIG infusion. This can be a helpful approach to determining the impact and efficacy of IVIG in reducing autoantibodies and other molecules that are considered pathogenic that may be correlated with the clinical course (i.e., remission or flares) of the disease.

Il existe souvent une corrélation entre le modèle ANA et la présence d’anti-ADN et d’autoanticorps à d’autres autoantigènes intracellulaires. L’identification du modèle de coloration est utile pour le laboratoire parce qu’elle peut influencer la recherche des autoanticorps les plus appropriés par des profils autoantibody spécifiques à la maladie ou d’autres tests plus spécifiques. Par exemple, en présence d’un type de fluorescence cytoplasmique ou nucléaire, une immunoassay qui comprend les antigènes cytoplasmiques Jo-1, M2/PDC (mitochondries), ribosomal P, EEA1, GW Bodies ou les autoantigènes Sp-100, peut être indiquée (3). En présence d’un modèle homogène, une recherche d’anticorps dsDNA, histone ou chromatine peut être indiquée. Les modèles antinucléolaires demeurent l’un des principaux défis pour le laboratoire clinique parce qu’il est difficile d’utiliser les technologies actuelles pour identifier les antigènes cibles (fibrillarine, B23, PM/Scl, Pol I/III, Th/To et autres) (4). Toutefois, lorsqu’un motif anti-centromere est présent, la confirmation n’est généralement pas nécessaire. Plus récemment, il y a eu l’attention au modèle fin dense moucheté (DFS) et les preuves indiquant que les patients présentant les anticorps anti-DFS « monospécifiques » n’ont pas une maladie rhumatismale associée à l’autoantibody (5).

En général, le titer de dépistage HEp-2 IFA n’est pas corrélé avec des caractéristiques cliniques telles que l’activité de la maladie ou les poussées, et n’est donc pas un paramètre particulièrement utile pour suivre le cours de la maladie ou estimer l’efficacité du traitement (10;11). Il convient de souligner que cette conclusion n’est pas fondée sur des études de laboratoire prospectives minutieuses utilisant des tests normalisés sur des plates-formes diagnostiques avancées ou dans des indices définis de maladie clinique (p. ex. SLEDAI, SLAM). En général, les titres de l’IFA Hep-2 peuvent fluctuer au fil du temps, et les anticorps ont tendance à être détectables en phases d’activité de la maladie et de rémission (12;13), bien qu’il y ait des exceptions signalées. Une exception peut être la présence de niveaux élevés d’anticorps anti-U1-RNP qui sont caractéristiques de la maladie mixte des tissus conjonctifs (14).

Une autre exception est liée à la preuve que les niveaux d’anticorps anti-DsDNA sont souvent corrélés avec certaines caractéristiques cliniques, par exemple la néphrite du lupus, et sa détermination est obligatoire dans le travail diagnostique des patients atteints de SLE et le suivi des cas nephritiques (15;16). Cependant, il est apprécié que certains essais pour la détection anti-DsDNA sont meilleurs que d’autres dans la mesure des changements cliniquement importants dans les niveaux d’anticorps.

Le HEp-2 IFA est la méthode de dépistage préférée pour détecter les autoanticorps dans les maladies rhumatismales auto-immunes systémiques humaines (SARD) et plusieurs autres affections auto-immunes (c.-à-d. cirrhose biliaire primaire, maladies hépatiques auto-immunes, arthrite juvénile à risque d’uvéite). Dans sard l’ANA a été appelé l’étalon-or pour le criblage d’ANA (1). Cependant, étant donné les faibles niveaux apparents de certains autoantigènes dans les substrats cellulaires HEp-2, tels que le SSA/Ro, le Jo-1 et le P ribosomal, le test peut avoir un résultat négatif même lorsque ces autoanticorps sont présents (2). Par conséquent, si les résultats cliniques sont fortement suggestifs du lupus systémique, de la polymyosite (myopathie inflammatoire autoimmune), du syndrome de Sjögren, de la sclérodermie ou d’autres conditions autoimmunes systémiques, la recherche d’autoanticorps spécifiques est plus efficace en commander un profil spécifique à la maladie, particulièrement si le résultat d’ANA est négatif.

Oui, dans la mesure du possible, il est important d’essayer d’identifier des cibles d’anticorps spécifiques. Il existe une grande variété de cibles autoantibody connues dans les maladies rhumatismales systémiques et cela augmente à un rythme rapide (7-9). Le test de dépistage HEp-2 IFA est capable de révéler plus de 100 types différents d’autoanticorps (1), dont seulement une partie ont une association clinique validée et seulement environ 30-40 d’entre eux peuvent être révélés par des analyses de laboratoire de routine. D’un point de vue coûts-avantages, il n’est donc pas possible de détecter la spécificité cible dans tous les cas positifs d’ANA. Il existe un consensus international selon lequel, pour apporter une valeur clinique à l’IFA HEp-2, il devrait être testé par réflexe à un essai de phase solide spécifique à la maladie.

La présence d’autoanticorpdies IgG à haut litre et leur persistance au fil du temps sont caractéristiques de plusieurs maladies rhumatismales auto-immunes, telles que le SLE, la sclérodermie, le syndrome de Sjögren, la maladie mixte des tissus conjonctifs et la maladie hépatique auto-immune (PBC, hépatite auto-immune). Les autoanticorps de titer élevés ne devraient pas être considérés comme épiphénomenona de l’infection ou de l’inflammation. Cependant, autoanticorps à bas titers (<1:80) peut être présent chez les patients atteints de diverses maladies non auto-immunes (infections virales et bactériennes, néoplasie, etc),chez les parents de patients atteints de maladies auto-immunes et chez des sujets apparemment en bonne santé MitogenDx a fixé un arrêt fixe pour la positivité à un litre de 1:80 pour diminuer le pourcentage de faux positifs. Une grande étude multicentrique a montré que ANA sans aucune signification clinique peut être trouvée dans 30% des sujets sains à un litre de 1:40 et dans 5% à un litre de 1: 160 (6).

Les deux tests utilisent essentiellement la même technologie et le même essai – un test d’immunofluorésence indirecte (IFA) sur les substrats cellulaires HEp-2. La principale différence est que de nombreux laboratoires qui effectuent le test anticorps antinucléique (ANA) ne signalent que les anticorps qui réagissent avec le noyau cellulaire, tout en ignorant un large éventail d’autoanticorps cliniquement pertinents qui réagissent avec le cytoplasme et les cibles du cycle mitotique ou cellulaire. Par conséquent, le terme ANA est restrictif, et le terme anticorps anticellulaires/cellulaires est plus complet et plus complet.

MitogenDx ne recommande pas de répéter un test HEP-2 IFA ou ENA jusqu’à ce qu’au moins 6 mois se soient écoulés à partir d’une prise de sang précédente et d’un test ultérieur. Toutefois, s’il existe une raison clinique impérieuse, un test SUPPLÉMENTAIRE ENA ou HEp-2 IFA peut être perspicace. Les tests répétés de profil d’ANA et d’autoantibody sont les plus utiles dans la phase diagnostique des évaluations patientes (c.-à-d. sera avec ana positif au commencement négatif ou de faible titer d’un patient présentant une maladie autoimmune systémique médicalement définie). Un profil autoantibody spécifique à l’ANA ou à la maladie n’est pas indiqué à moins qu’un changement dans l’image clinique soulève le soupçon d’un changement dans la présentation sous-jacente de la maladie ou l’apparition d’une autre maladie rhumatismale associée (par exemple le syndrome secondaire de Sjögren, le syndrome secondaire d’anti-phospholipide ou un syndrome de chevauchement, vasculite, aspect soudain du phénomène de Raynaud).